所需的CY3-NHS酯的量取決于待標記蛋白的量，以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例：假設所需的標記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000)，用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯，得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL，詳細計算過程如下：1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150，000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg/μL=5.05μL(CY3-NHS酯)4.運行偶聯反應1)將室溫新鮮制備的10mg/mLCY3-NHS酯緩慢加入到0.5mL蛋白質樣品中于溶液中，輕輕搖動混勻，然后短暫離心，將樣品收集于反應管底部。請勿混勻，否則2)將反應管安置避光處，在接下來的間隔輕輕蛋白水解60分鐘。10-15分鐘，輕輕翻轉幾次以充分混合5.偶聯偶聯物以下方案是使用SepHadexG-25柱封閉染料-偶聯偶聯物的范例。1)根據制造說明準備SepHadexG-25柱。2)將反應混合物(來自“Runconjugationreaction”)加載到SepHadexG-25柱的頂部。3)一旦樣品在頂部樹脂表面下方運行，立即添加PBS(pH7.2-7.4)。4)向所需樣品添加更多PBS(pH7.2-7.4)即可完成柱密封。羰花青染料用作 Di 來標記細胞、細胞器、脂質體、病毒和脂蛋白。中國香港武漢熒光染料

與花青和羅丹明染料一樣，熒光素也是一種有機染料。熒光素的比較大吸收波長為494nm，比較大發射波長為521nm（通常吸收藍色范圍內的光并發射綠色范圍內的光），熒光素是一種高熒光物質。即使在非常少量的情況下也可以檢測到它，并且在與抗體結合時用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣，熒光素價格低廉且易于使用，使其成為生物學研究中很受歡迎的染料之一。與大多數其他染料不同，熒光素在水溶液中是無毒的。因此，它是極少數用作地下水示蹤劑的染料之一。北京深圳熒光染料熒光染料可以單獨使用，也可以組合成復合熒光染料使用。

    小動物***熒光成像技術是現***物醫學研究領域的一項重要技術，因其具有操作簡單、實時直觀、靈敏度高、實驗成本低等特點，已廣泛應用于生命科學、醫學研究及藥物開發等方面。納米材料在生物醫學領域得到廣泛應用，旨在解決傳統醫學面臨的各種醫學挑戰，包括生物利用度差，靶向特異性受損，全身和***毒性等。納米材料具有很多與眾不同的優點，比如多功能性、大的負載量、靶向性、血液循環時間長等。納米材料在生物醫學中起著關鍵作用，可以有效攜帶成像探針、***劑或生物材料并傳遞至靶點，如特定的***、組織甚至細胞。光學成像主要包括生物發光（ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ，ＢＬＩ）和焚光成像（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ，Ｆ１）兩種技術。前者利用焚光素酶基因（如ＦＬＵＣ，ＲＬＵＣ，ＧＬＵＣ）標記細胞或ＤＮＡ，其表達產物與莖火蟲素類底物反應產生熒光。后者包括多種熒光蛋白基因（如ＧＦＰ，ＲＦＰ，ＹＦＰ等）、有機熒光染料、熒光上轉換納米粒子、量子點等的應用。

綠色熒光染料ICG的主要作用吲哚菁綠（IndocyanineGreen，簡稱ICG）是一種廣泛應用于醫學和生物領域的熒光染料。它具有獨特的化學結構和性質，因此被***用于熒光顯像、光熱***、生物識別和藥物輸送等領域。吲哚菁綠的綠色溶解度是其在水中的溶解度，它是衡量該染料在溶液中的溶解能力的重要指標。吲哚菁綠具有較好的水溶性，可以在水中迅速溶解，形成穩定的溶液。這一特性使得吲哚菁綠在醫學診斷和***中得到廣泛應用。吲哚菁綠的主要作用之一是在醫學影像學中作為造影劑。由于其具有強烈的熒光特性，能夠在近紅外光譜范圍內吸收和發射光線，因此被***用于近紅外熒光顯像技術中。在臨床中，醫生可以通過注射吲哚菁綠溶液，利用近紅外光源對患者進行顯像，以觀察和評估病變部位的血液灌注情況、淋巴引流途徑等。這為醫生提供了非侵入性、實時性的影像信息，有助于準確診斷和指導***。此外，吲哚菁綠還在光熱***中發揮著重要作用。光熱***是一種利用光熱效應殺滅腫瘤細胞的方法。吲哚菁綠可以吸收近紅外光并將其轉化為熱能，從而使附近的腫瘤細胞受熱破壞。這項技術在*****中具有巨大潛力，因為它可以實現高度精細的***，同時比較大限度地減少對周圍正常組織的損傷。非磺化花青類染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7 和 cy7.5。

PI是一種可對DNA染色的細胞核染色試劑，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光。常用于細胞凋亡(apoptosis)或細胞壞死(necrosis)的檢測，常用于流式細胞儀分析。盡管PI不能通過活細胞膜，但卻能穿過破損的細胞膜而對核染色。PI經常被用來與Calcein,AM、Hoechst33258或Hoechst33342等一起使用，能同時對活細胞和死細胞染色。PI-DNA復合物的激發和發射波長分別為535nm和615nm。2.染色過程（1）將1/10培養基體積的PI染色液加入到細胞培養基中（也可以用1/10濃度的PI緩沖液代替培養基）。（2）在37℃培養細胞10～20分鐘。（3）用PBS或合適的緩沖液洗滌細胞兩次。（4）用535nm激發波長，615nm發射波長的濾光器的熒光顯微鏡觀察細胞。儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。注意事項：PI對人體有刺激性，請注意適當防護。南京星葉生物提供多種性價比高的各類活化熒光素，例如Cy系列、Super Fluor 系列（效果同Alexa Fluor系列）等。中國香港武漢熒光染料

Super Flour 系列熒光探針，具有更強的熒光強度，更廣的pH應用范圍（pH 4～10）, 更好的抗淬滅性。中國香港武漢熒光染料

第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料，**初由化學公司HoechstAG生產。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺，具有向A-T富集區插入的趨勢，因此后者不常使用。與DAPI相似，此類染料受到紫外線激發并在455nm下發射比較大值，在無結合狀態下變為510–540nm。Hoechst染料還具有細胞滲透作用，因此可用于固定細胞和活細胞。與DAPI不同是，Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無法透過細胞膜。在細胞培養中，因為該染色劑無法進入完好的細胞內，所以常常被用來區分活細胞和死細胞。碘化丙啶也是一種結合劑，但對不同的堿基沒有特異性。在核酸結合態下，其比較大激發波長為538nm，比較高發射波長為617nm。未結合狀態下碘化丙啶的比較大激發和發射被移到較短的波長和較弱的強度。它也可以在不改變其熒光特性的情況下與RNA結合。要區分DNA和RNA，必須使用足夠的聚合酶。中國香港武漢熒光染料