胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%胰酶（Trypsin）、0.02%EDTA和酚紅,不含Ca2＋和Mg2＋。該消化液已用0.22μm濾膜過濾除菌,可以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化。本胰酶細胞消化液具有方便快速的特點,通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數貼壁細胞。使用說明：貼壁細胞的消化：1、吸去培養液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。2、加入少量胰酶細胞消化液（含酚紅）,略蓋過細胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。3、顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化,或者用***吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來；此時吸除胰酶細胞消化液；加入含血清的完全細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。4、如果發現消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。5、如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。胰酶細胞消化液(不含EDTA)消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。天津重組胰酶產品介紹

1、細胞培養過程中為什么要使用胰酶呢？胰酶的作用是什么？胰酶是一種蛋白酶，酶切位點是肽鏈的Lys或Arg兩個殘基的羧基端肽鏈，通過在特定位置上降解蛋白，使細胞膜上與培養皿壁結合處蛋白降解，從而使兩者分離。這時，細胞由于自身內部細胞骨架的張力以及培養液表面張力可成為球形。圖1.胰酶酶切位點2、使用胎牛血清培養細胞，在使用胰酶消化時發現血清可以終止此過程，這是什么原因？血清終止的原理其實是競爭抑制，就是用過量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結合，使胰酶失去消化細胞蛋白的機會。3、為什么使用了胰蛋白酶消化，細胞還是成團的，這可能是什么原因導致的？①消化時間不夠②吹打力度不夠③胰酶消化液濃度不夠④細胞密度過高之后才消化傳代⑤胰酶存儲不當，或者使用了過期胰酶海南進口胰酶是什么胰蛋白酶水解或胰蛋白酶化是蛋白質被胰蛋白酶消化或處理的過程，因此被稱為胰蛋白酶化。

    收藏查看我的收藏0有用+1已投票0胰蛋白酶編輯鎖定本詞條由“科普**”百科科學詞條編寫與應用工作項目審核。胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種，EC，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中，作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后，作為胰液的成分而分泌，受腸激酶，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內切酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切斷。它不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。是特異性**強的蛋白酶，在決定蛋白質的氨基酸排列中，它成為不可缺少的工具。中文名胰蛋白酶英文名Trypsin別稱胰酶化學式C6H15O12P3分子量≈24000CAS登錄號9002-07-7EINECS登錄號232-650-8[1]熔點115℃[1]水溶性易溶外觀白色或類白色目錄1生物制品簡介?物化性質2*典標準?來源含量?制法要求?性狀?鑒別?檢查?效價測定?制劑3胰蛋白酶的醫學檢查?檢查名稱?分類?胰蛋白酶的測定原理?試劑?操作方法?正常值?化驗結果臨床意義?附注?相關疾病4生物*品說明?*理作用?適應證?禁忌證?用法用量?注意事項?不良反應：?**點評5其他。

細胞培養的優點:1.研究的對象是活細胞在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。4.研究內容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。變色的胰酶同樣能很好的用于細胞的解離，請放心使用。

    EDTA-胰蛋白酶的配制1、胰酶是，就是說，盡量不要用水來溶，因為要保持滲透壓。2、EDTA的工作液溶度是－，根據細胞消化的難易程度自己調整。EDTA并不是必須的，容易消化的細胞可不加。EDTA對細胞貼壁性有影響，因此使用時要甚重。如果影響貼壁，但消化時必須要用，那么在用完全培養基終止消化后，可離心棄上清，再加完全培養基培養，可去除EDTA。如果對貼壁沒影響，那么可不離心。3、EDTA的濃度也是質量體積比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意，血清可終止胰酶的作用，但不能終止EDTA的作用，對有些細胞來說，終止消化后的離心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH為8左右的時候**易溶解，在配制時可先滴幾滴NaOH將pH調至8，注意，胰酶可使溶液變酸，所以要邊溶邊測pH，隨時調整。注意，不可加過量NaOH，否則過堿，細胞會受不了。6、胰酶EDTA相對比較難溶，可用磁力攪拌器，或放入4度冰箱過夜，待溶解后過濾除菌。7、可配2－3乘的胰酶，這樣比較節約時間和濾器，用的時候對上滅菌PBS即可。8、儲存液放在－20度冰箱凍存，使用液放在4度，用的時候不要放在27度水浴鍋溫浴，因為這樣會讓胰酶很快失效，使用前放在室溫下一會，因為加的量很少，所以一般不會凍壞細胞。9、消化時。 適用于貼壁細胞的消化傳代；也可用于組織細胞分離的初步消化。天津重組胰酶產品介紹

EDTA是一種化學螯合劑，主要作用在于能螯合Ca、Mg離子，使細胞分離。天津重組胰酶產品介紹

    (含)英文名:(含)儲存條件:-20℃產品簡介:胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點在于已經活化的胰蛋白酶,能夠繼續活化更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質水解為肽,進而分解為氨基酸,其**適溫度約為37℃。胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()由、除菌。本試劑可以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下1min左右就可以消化大多數貼壁細胞。使用說明(*供參考):1.貼壁細胞的消化①吸除培養液,用無菌PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次,去除殘余的血清。②加入少量胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液(),略蓋過細胞即可,室溫放置。(不同的細胞消化時間有所不同)③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化;或者用***吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。④如果發現消化不足,則加入胰蛋白酶-碳酸氫銨溶液()重新消化。⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落。 天津重組胰酶產品介紹