胰酶操作步驟：

(*供參考) ：1. 吸取培養基，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次，以除去殘余的血清。2. 加入適量的胰蛋白酶消化液，略蓋過細胞即可。根據細胞的特性可以增加或減少胰酶用量，室溫放置30秒至2分鐘。（不同的細胞消化時間有所不同）3. 顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化呈白茫狀；或者用***吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。4. 此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。如果發現消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。 胰酶顏色的變化是由PH值的變化引起，歸因于使用干冰運輸。重慶EDTA胰酶采購

    一、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗簡介：EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需的EDTA是乙二胺四乙酸，一種金屬螯合劑。它通常與胰蛋白酶結合使用。原因是鈣和鎂等金屬離子會降低胰酶的活性，因此在使用胰蛋白酶消化液時應添加EDTA。它可以螯合這些離子并消除胰酶的**作用。二、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗所需材料及試劑：PBS,氫氧化鈉,EDTA,三、EDTA-胰蛋白酶的配制實驗步驟：1.磷酸酶的質量/體積比為％，即將。注意，盡量不要用水溶解，因為必須保持滲透壓。％％，可根據細胞消化的難度進行調整。不需要EDTA，可以省略易于消化的細胞。EDTA對細胞粘附有影響，因此應大量使用。如果影響粘附，則必須將其用于消化，在用完全培養基終止消化后，離心并棄去上清液，然后添加完全培養基以進行培養以除去EDTA。如果不影響附著力，則不要離心。。用磷酸酶稀釋PBS。4.請注意，血清可以阻止血漿酶的作用，但不能阻止EDTA。對于某些細胞，有必要在消化后停止離心。5.當pH約為8時，磷酸酶和EDTA**易溶解。在制備過程中，您可以先滴幾滴氫氧化鈉以將pH調整為8。請注意，磷酸酶會使溶液變酸，因此您應隨時溶解時測量pH值。調整。請注意，不應添加過量的氫氧化鈉，否則電池將無法承受堿的作用。重慶EDTA胰酶采購消化使用的胰酶是含EDTA還是不含的？

胰蛋白酶廣泛應用于食品加工、制藥、生化檢測和制革等多種行業。在制藥工業中，胰蛋白酶可使天然蛋白、變性蛋白、纖維蛋白和黏蛋白等水解為多肽或氨基酸，以達到***的目的。胰蛋白酶生物藥用于***呼吸道疾病，可以溶解黏痰和膿性痰，還可以***毒蛇咬傷等。由于血清中含有非特異性抑肽酶，故胰蛋白酶不會消化正常組織，而能分解膿性痰等黏性分泌物，促進***、化療藥物向病灶滲透。在食品工業中，胰蛋白酶主要用于水解價值較高的動植物性蛋白等，以牛乳為例，利用胰蛋白酶水解其中的酪蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等致敏原，能生產低敏配方奶粉。在制革工業中，胰蛋白酶用于皮革脫灰軟化，也可以利用胰蛋白酶提取具有良好生物相容性和生物降解性的膠原蛋白。[1]

胰酶分裝凍存時要注意什么？胰酶分裝時盡量分裝成多瓶，并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時體積會膨脹，多次使用同一瓶胰酶反復凍融會降低消化效果并增大污染的可能性。5、怎么才能判斷胰酶消化完全？注意：不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才表示消化好了。一般肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙狀移動就可以了，就應該停止消化。6、胰酶適用于哪些細胞消化？它的消化效果與哪些有關呢？胰酶適用于消化細胞間質較少的軟組織和傳代細胞，如胚胎、上皮、肝、腎等組織，但對纖維性組織和較硬的*組織效果較差。胰酶的消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關。胰酶細胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。

對一般細胞0.25%胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100mlPBS,0.25g胰酶步驟：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸餾水)2稱胰酶0.25g3加入PBS中，低速攪拌〈4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中4調PH7.45仍在冰浴中6過濾，分裝，-20℃保存，4℃短期內用完tip:低速很重要，機械攪拌對酶是一種沖擊，如果起沫，酶就變性了。低溫，防止酶失活對難消化的細胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因為EDTA可以絡合Ca2，增加消化效力如果消化液中含有胰酶和EDTA，好去除。重慶EDTA胰酶采購

胰酶細胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA。重慶EDTA胰酶采購

胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養，以及體外細胞培養過程中，均會使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細胞間蛋白質，使組織或細胞離散成單個細胞。胰酶在37℃pH8.0條件下消化能力**強。常用胰酶工作濃度為0.25%。EDTA可以螯合鈣鎂離子，胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速細胞間連接蛋白的水解，起到增強消化的效果。酚紅是一種pH指示劑，溶液偏堿性時呈紫紅色，偏酸性時呈橘紅色，近中性時呈粉紅色。本產品為0.25%胰蛋白酶消化液，含0.25%胰蛋白酶，溶于Hank’s緩沖液，不含EDTA，無酚紅指示劑，經0.22μm過濾除菌。重慶EDTA胰酶采購