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無錫億賽生物科技有限公司 細(xì)胞培養(yǎng)基|免血清培養(yǎng)基|緩沖液|胰酶
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無錫億賽生物科技有限公司成立于2023年,是一家專注于細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的微創(chuàng)新一體化供貨服務(wù)的公司。我們致力于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售細(xì)胞培養(yǎng)試劑和耗材。公司的經(jīng)營和管理理念是“正直、誠信、友善、合作”,我們依靠穩(wěn)定高效和經(jīng)驗(yàn)豐富的執(zhí)行團(tuán)隊(duì)來支持我們的業(yè)務(wù)。我們有信心在未來五年內(nèi)成為生命科學(xué)和生物制藥領(lǐng)域誠信可靠的上游產(chǎn)品供貨商。

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西藏基礎(chǔ)培養(yǎng)基常用知識 北京同創(chuàng)正業(yè)生物科技供應(yīng)

2025-01-20 01:08:50

    所描述的實(shí)施例**是本申請一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例。基于本申請中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)24h,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液;整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過程中,控制發(fā)酵溫度35℃,通風(fēng)比1∶,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,溶氧維持在20%。無酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。西藏基礎(chǔ)培養(yǎng)基常用知識

    附圖說明圖1是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌苗在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗蓮座葉及根系發(fā)育;c:萌發(fā)率;d主根長度;a和b中bar=;圖2是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌植株地上部分及根系發(fā)育;c:無菌植株花***發(fā)育(左)和花粉的亞歷山大染色(右);d:主根長度;e:株高;f:蓮座葉長度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;圖3是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,油菜無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:主根長;f:大于;a中bar=、b中bar=;圖4是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)的對比效果圖,a:無菌植株在培養(yǎng)基中生長情況;b:無菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:根數(shù);a和b中bar=;圖5是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導(dǎo)率;a和c中bar=;圖6是cs和ms兩種培養(yǎng)基上。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口F12培養(yǎng)基支持多種細(xì)胞的生長和增殖。

    這里介紹熱力消毒**法。高熱破壞微生物蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,從而導(dǎo)致微生物死亡。受高熱作用后,蛋白質(zhì)分子運(yùn)動加快,肽鏈連接鍵斷裂,蛋白變性凝固;細(xì)胞膜功能受損使胞內(nèi)物質(zhì)漏出,**內(nèi)外環(huán)境平衡失調(diào)。不同種類微生物對熱的耐受力不同,多數(shù)無芽胞**經(jīng)55-60℃作用30-60分鐘后死亡,100℃時(shí)迅速死亡。有芽胞**則對高溫有強(qiáng)的抵抗力,如肉毒芽胞梭菌煮沸需3—5小時(shí)才死亡。熱力**分干熱**法和濕熱**法兩大類,相同溫度下后者較前告效力大,其原因是:①濕熱環(huán)境中菌體蛋白易凝固;②濕熱穿透力比干熱大;③濕熱蒸氣變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可釋放潛熱,迅速提高被**物體的溫度。1.干熱(dryheat)**法(1)焚燒。直接點(diǎn)燃或在焚燒爐內(nèi)進(jìn)行,*適用于廢棄物品或動物尸體。(2)燒灼。直接以火焰**,適用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室接種環(huán)、針和試管口等**。(3)干烤。在干烤箱內(nèi)進(jìn)行,加熱至150-180℃2-4小時(shí)達(dá)到**效果,適用于高溫下不變質(zhì)、不被破壞和不蒸發(fā)的物品,如玻璃器皿、瓷器,不能用于塑料、棉、紙制品。2.濕熱(moistheat)消毒**法(1)巴氏消毒法。巴氏消毒法(pasteurization)是用較低溫度殺滅液體中的病原微生物或特定微生物而保持物品中所需的不耐熱成分的方法。

    這些重組蛋白和動物來源成分對生物制品的**性有很大影響。成本低。主要用途應(yīng)用案例采用199(SLM)、MEM(SLM)和DMEM(SLM)低血清培養(yǎng)基分別培養(yǎng)Vero細(xì)胞、BHK21細(xì)胞和CHO細(xì)胞,新生牛血清用量可以從10%降至3%,減少新生牛血清使用批次和批間差的影響,減少生物制品純化損失,減少由于不確定蛋白或者其它血清組分帶來干擾和差異的風(fēng)險(xiǎn),提高制品**性。低血清培養(yǎng)基可以在方瓶、3L轉(zhuǎn)瓶、15L轉(zhuǎn)瓶及生物反應(yīng)器中培養(yǎng)細(xì)胞,在*苗生產(chǎn)中可以達(dá)到低血清高密度的培養(yǎng)效果。低血清培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,易使細(xì)胞增殖迅速,代謝旺盛,代謝產(chǎn)物對細(xì)胞有不良影響,易產(chǎn)生細(xì)胞老化脫落現(xiàn)象。因此需要適當(dāng)增加換液次數(shù),增加傳代頻率。獲取同樣的細(xì)胞量,用低血清培養(yǎng)基將比用傳統(tǒng)培養(yǎng)基縮短近1/3的時(shí)間,可提高生產(chǎn)效率。采用199(SLM)低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細(xì)胞分泌狂犬*苗病毒,滴度明顯高于采用199培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)獲得的滴度。采MEM(SLM)低血清培養(yǎng)基BHK21細(xì)胞,在本實(shí)驗(yàn)情況下12代內(nèi)細(xì)胞形態(tài)和致密度均優(yōu)于MEM培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)情況,因而可以預(yù)期其產(chǎn)生的口蹄*、甲肝等*苗生產(chǎn)的病毒產(chǎn)量將提高。低血清培養(yǎng)基用于反應(yīng)器Vero細(xì)胞狂犬*苗的生產(chǎn),實(shí)踐證明效果良好。采DMEM。DMEM培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。

    1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為8個(gè)。如圖4所示。對比培養(yǎng)例4:將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基,其余完全同培養(yǎng)實(shí)例4,1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為:馬鈴薯莖端在1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率為100%,培養(yǎng)16d的幼苗,表現(xiàn)為植株健壯、平均莖高、平均莖中粗為,葉色濃綠,根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為6個(gè)。如圖4所示。培養(yǎng)實(shí)例4和對比培養(yǎng)例4的培養(yǎng)結(jié)果比較:馬鈴薯莖端在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的存活率均為100%;在相同條件下培養(yǎng)16d時(shí),與1/2ms生長培養(yǎng)基相比,1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢更佳,其莖高、莖中粗、根的數(shù)量均優(yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基。如圖4所示。培養(yǎng)實(shí)例5:哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)(1)擬南芥葉片愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。(2)擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)基:cs基本培養(yǎng)基+2,,用超純水溶解,。cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。。無酚紅培養(yǎng)基在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中減少了潛在的毒性作用。寧夏基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)口

MEM培養(yǎng)基在藥物篩選中有重要作用。西藏基礎(chǔ)培養(yǎng)基常用知識

    但其引入的尿素和**銨成分含量過高,這對多種植物生長不利;cna一種植物**培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基及cna一種無nh4no3植物**培養(yǎng)用培養(yǎng)基分別公開了一種無硝酸培養(yǎng)基,獲得較好的培養(yǎng)效果,但新引入的硝酸鈣和硝酸鎂兩種成分均為易制爆試劑;cna一種植物組培**培養(yǎng)基公開了一種無硝酸銨培養(yǎng)基,可提高植物組培成功率,但引入了易制爆試劑硝酸鈉,且其*適用于植物離體培養(yǎng),不具有通用性。此外,現(xiàn)有的植物**培養(yǎng)基,包括ms、b5、n6以及其他公開的植物**培養(yǎng)基,它們被用于配制液體培養(yǎng)基時(shí)的ph值波動大,在用于植物水培時(shí)均需要調(diào)節(jié)ph,過程繁瑣,耗費(fèi)時(shí)間。因此,急需一種既無硝酸銨、也不引入新的易制爆成分,并且培養(yǎng)效果與ms培養(yǎng)基相當(dāng)或優(yōu)于ms培養(yǎng)基的***適用于多種植物**培養(yǎng)的ph穩(wěn)定型培養(yǎng)基。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:有鑒于此,本發(fā)明的目的是提供一種在不額外引入易制爆成分的前提下,去除了市場禁止流通的易制爆成分nh4no3,且ph穩(wěn)定的***適用于多種植物**培養(yǎng)的植物基本培養(yǎng)基,以解決現(xiàn)有植物**培養(yǎng)基存在的技術(shù)問題。本發(fā)明廣適性植物**培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno32662mg、。西藏基礎(chǔ)培養(yǎng)基常用知識

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