Piezo-ICSI程序:

使用直徑100-mm的細胞培養(yǎng)皿上蓋,準備操作盤；按照Piezo操作系統的要求，將4μL左右的汞從后部裝入注射針中，輕輕將汞推至針尖處，在20-25℃室溫下，準備進行顯微操作。具體操作前，首先取10枚卵母細胞置于15L含3 % suerose的HEPES-CZB操作滴中備用；然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+ 12 % PVP-360操作滴充分混合；再將單個精子從尾部吸入注射針，用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾；連續(xù)剪切5個精子后，將吸入全部精子頭的注射針轉移到放置卵母細胞的操作滴中，準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質中。注射時，從時鐘9點的方向吸住卵母細胞，使紡錘體保持在6點或12點的位置，從3點的方向輕輕進針，同時用Piezo脈沖擊穿透明帶，將透明帶碎片吹出注射針的同時，將精子頭吹至針尖處，繼續(xù)進針，直至針尖插入卵母細胞深處，幾乎貼近對側質膜時，用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質膜，將精子頭吐出，回吸注入卵內多余的操作液，輕輕退針，完成一次注射。依次操作，盡快實現該批卵母細胞的注射，室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎，并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射，在注射HCG后17 h,完成全部卵母細胞的精子注射。 Piezo震擊驅動單元 (MB-U) 移動范圍約±5 mm ,移動速度約0.04 mm/s, 移動分辨率約0.1 um。北京Piezo壓電ES注射

卵胞漿內單精子顯微注射（ICSI）不僅用于人類輔助生殖（ART），而且在稀有物種保護、轉基因動物的生殖系拯救或任何獸醫(yī)輔助受孕過程中也被***用于獸醫(yī)體外受精。壓電輔助ICSI于1995年***被描述，可用于標準ICSI失敗的動物（如小鼠）的輔助受孕。該技術所需的顯微注射工作站與標準ICSI非常相似，但在毛細管支架上增加了一個壓電沖擊單元。本用戶指南重點介紹壓電輔助顯微注射程序本身。摘要卵母細胞胞漿內單精子顯微注射，即將單個精子直接注射到卵子的細胞質中，***在倉鼠身上被描述，并已成功應用于人類，以及其他物種，如小鼠。在動物模型中進行的ICSI是研究直接受精過程以及不孕原因的比較好工具。特別是在生物醫(yī)學研究領域，當精子被共同注射或包裹外源DNA時，ICSI也可以用作基因轉移技術。此外，當轉基因表達或突變損害雄性或雌性小鼠的生存能力或生育能力時，通常會應用小鼠ICSI。在這些情況下，壓電輔助ICSI可以成為拯救和維持非常有價值的小鼠品系的一種手段，因為正常的ICSI已被證明在小鼠身上很困難。幾項研究表明，通過壓電驅動的微毛細管注**子對小鼠卵子的創(chuàng)傷遠小于傳統方法。此外，壓電輔助ICSI已被證明可以顯著提高受精成功率。北京壓電單精子胞漿內注射壓電破膜儀 PMM 具有高度的精確性和可調節(jié)性，可以根據實際需求進行調整，提高操作效率。

在正常受精過程中，精子進入卵子后，會導致卵細胞內的鈣離子濃度發(fā)生持續(xù)數小時的周期性的短暫升高，這個過程被稱為卵子的“鈣震蕩”，鈣震蕩會引發(fā)大量生化反應事件，代謝活動重新活躍起來，這個過程稱為卵子***。精子***后的卵子會發(fā)生一系列的變化，包括細胞內鈣離子濃度升高，皮質反應，透明帶反應等，然后卵子完成第二次減數**，排出第二極體，開啟后續(xù)的胚胎發(fā)育過程。第二代試管嬰兒（ICSI）授精后，成熟卵子見不到2原核的受精標志，稱為ICSI完全受精失敗。ICSI受精失敗在ICSI周期中比例約為1%-3%，其中30%的夫婦會發(fā)生反復持續(xù)的受精失敗，是臨床中極其棘手的難題。即使是經驗豐富的胚胎學家，也無法避免這種情況。卵母細胞***失敗是ICSI受精失敗的主要原因之一。

什么是壓電式PIEZO-ICSI？

壓電式-ICSI是一種先進的ICSI技術，可減少對卵子的傷害，并與傳統的ICSI相比更能提高受精率。到目前為止，臨床研究表明壓電式ICSI具有低的卵子降解率(1%)和高的受精率（89%）。相較于傳統的ICSI，壓電式ICSI使用較細的注射針尖，而注射針尖是鈍的而非尖銳的，因此降低傷害卵子的可能性。

電壓式PIEZO-ICSI是否**？研究表明，壓電式ICSI并不影響卵母細胞骨架以及對卵母細胞在細胞**時染色體的分離沒有影響。它也表明，從壓電ICSI衍生的囊胚非整倍體率是與常規(guī)ICSI類似的。大家可以對比一下電壓式-ICSI和常規(guī)ICSI對比 PRIME TECH PMM 用于小鼠ICSI。

壓電效應：某些電介質在沿一定方向上受到外力的作用而變形時，其內部會產生極化現象，同時在它的兩個相對表面上出現正負相反的電荷。當外力去掉后，它又會恢復到不帶電的狀態(tài)，這種現象稱為正壓電效應。當作用力的方向改變時，電荷的極性也隨之改變。相反，當在電介質的極化方向上施加電場，這些電介質也會發(fā)生變形，電場去掉后，電介質的變形隨之消失，這種現象稱為逆壓電效應。依據電介質壓電效應研制的一類傳感器稱為壓電傳感器。PMM高精度控制，顯微注射針的移動分辨率達到0.1um，可以精確穿透目標，不會誤傷其他結構。北京Piezo壓電ES注射

PRIME TECH PMM 6兼容多種顯微操作系統。北京Piezo壓電ES注射

1927年，伍德（R.W.Wood）與魯密斯（A.L.Loomis）首先使用高功率超聲波。使用藍杰文型的石英換能器配合高功率真空管，在液體中產生高能量，使液體引起所謂的空腔（cavitation）現象。同時也研究高功率超聲波對生物試樣的效應。在水下音響（underwatersound）的研究中發(fā)現，石英晶體并不是很好的換能器材料，但是它的振蕩頻率卻不隨溫度而變，亦即所謂的具有低的溫度系數。這種頻率對溫度的高穩(wěn)定性，用在控制振蕩器的頻率，及某些濾波器上**有用。1919年，卡迪（Cady）教授***次利用石英當做頻率控制器，圖四就是**早期的晶體控制振蕩器電路。因為晶體具有極高的Q值（注三），振蕩器的頻率受到晶體共振頻率的控制，且頻率不隨溫度變化而變。后來，皮爾士和皮爾士-米勒（Pierce-Miller）又發(fā)明一種以后廣被采用的晶體控制振蕩電路。在第二次世界大戰(zhàn)中，大約使用了一千萬個晶體振蕩器，用以建立坦克與坦克之間及地面和飛機之間的通訊。北京Piezo壓電ES注射