2025-04-08 00:15:55
MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free):RNA電泳的理想選擇在分子生物學實驗中,RNA電泳是研究基因表達、RNA結構和功能的重要技術。然而,RNA的穩定性較差,容易被RNase降解,因此在RNA電泳中使用無RNase污染的緩沖液至關重要。MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free)憑借其穩定的pH值、高分辨率和無RNase污染的特點,成為RNA電泳的理想選擇。產品特點無RNase污染:MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free)經過特殊處理,確保無RNase污染,能夠有效保護RNA樣品免受降解。穩定pH值:MOPS緩沖液的pH值接近中性(pH 6.5-7.9),能夠維持穩定的電泳環境,避免RNA在電泳過程中發生降解。高分辨率:MOPS緩沖液具有較低的粘度和較高的緩沖能力,能夠有效提高電泳分辨率,確保RNA條帶清晰。兼容性強:該緩沖液適用于多種檢測方法,如銀染、考馬斯亮藍染色或Northern blot。使用方法配制緩沖液:將MOPS電泳緩沖液(1×, RNase free)粉末溶解于去離子水中,攪拌至完全溶解。配制好的1×緩沖液pH值約為7.7±0.2。電泳操作:使用1×MOPS緩沖液制備瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠,將RNA樣品加入凝膠孔中進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用合適的染料(如EB或GoldView)對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。 DL1000 DNA Marker能夠為研究人員提供準確的分子量參考,幫助快速估算目標DNA片段的大小。江蘇重組人源膠原蛋白技術服務研發
PhusionDNAPolymerase是一種高保真聚合酶,廣泛應用于分子生物學實驗中,以下是一些實驗操作中的注意事項:1.反應體系配置:在50μL的反應體系中,建議使用1.5μL的5×PCREnhancer(如果需要)和0.5μL的PhusionDNAPolymerase,并補足超純水至50μL。如果反應體積不同,各組分需按比例調整。2.緩沖液選擇:對于GC含量較高的模板或具有復雜二級結構的序列,建議使用5×PhusionGCBuffer代替5×PhusionHFBuffer進行PCR反應。3.酶的添加:PhusionDNAPolymerase加入反應體系中,以避免其3-5外切酶活性降解引物。4.Mg2+濃度:5×PhusionHFBuffer中已含有1.5mMMgCl2。根據PCR反應的特點,如有必要,可額外添加MgCl2。5.dNTPs的使用:應使用200μM的每種dNTP,并且不要使用dUTP,因為PhusionDNAPolymerase不能有效利用dUTP或其衍生物。6.引物設計:設計18-35個堿基的引物,GC含量在40-60%之間,避免引物3端互補或Tm差異超過10°C。7.模板DNA的量:對于低復雜性DNA(如質粒、噬菌體或BACDNA),每個50μL反應的優量為0.01-10ng;對于基因組DNA,優量為5-100ng。position:absolute;left:505px;top:263px;">北京HPV病毒樣顆粒表達服務技術服務臨床前研究Taq DNA Polymerase是一種源自嗜熱菌Thermus aquaticus的耐熱性DNA聚合酶的耐熱性和高效的DNA擴增能力。
大腸桿菌表達系統在實際應用中具有一系列優勢和局限性:優勢:1.高表達水平:大腸桿菌能夠實現高水平的目標蛋白表達,通常能夠達到目標蛋白總細胞蛋白的10-50%左右。2.簡單易用:培養和操作相對簡單,不需要復雜的培養條件和設備。3.高純度蛋白:目標蛋白通常以包涵體形式存在,通過簡單的離心和洗滌步驟,可以得到高純度的蛋白。4.經濟實惠:培養成本相對較低,成本效益高。5.高生物活性:表達的蛋白通常具有較高的生物活性,適合功能研究和生物活性測試。局限性:1.蛋白質折疊問題:作為原核細胞,大腸桿菌可能無法正確折疊某些復雜蛋白質,導致表達產物不具功能性。2.內毒的素產生:表達系統中細胞壁內毒的素的產生可能導致細胞毒性,并對目標蛋白的純化和功能造成困擾。3.限制于溶解態蛋白質:主要適用于溶解態蛋白質表達,對于聚集態或難溶性蛋白質的表達可能存在困難。
在實驗室中使用Thioredoxin-NP-27腸激酶底物時,應遵循以下步驟:1.稀釋底物:首先,使用反應緩沖液(ReactionBuffer)將Thioredoxin-NP-27稀釋至0.1mg/ml。2.準備反應體系:取數個離心管,每個管中加入40μL稀釋后的Thioredoxin-NP-27溶液。3.添加腸激酶:然后,根據實驗設計,向每個離心管中加入不同量的腸激酶溶液,例如0μL、2μL、3μL等,以評估不同酶量對底物的切割效果。4.補充反應緩沖液:根據加入的腸激酶溶液量,相應減少反應緩沖液的量,以保持總體積不變。5.進行酶切反應:將離心管置于37℃±0.5℃水浴中,反應16小時。6.終止反應:反應結束后,向每個反應管中加入50μL的2×SDS凝膠加樣緩沖液,以終止酶切反應。7.電泳分析:取出各反應液20μL,進行SDS-PAGE凝膠電泳,以觀察酶切效果。8.計算腸激酶活性:根據GB/T41907-2022標準,按照提供的公式計算腸激酶活性,單位為腸激酶活性單位每毫克蛋白或固含物(U/mg)。9.保存條件:Thioredoxin-NP-27應在-30~-15℃保存,運輸時溫度應≤0℃。GoldenView II吖啶橙核酸染料是一種新型花青類核酸染料,有效替代傳統的溴化乙錠,廣應用于核酸檢測和染色。
DL15000 Plus DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 Plus DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標準,廣應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,覆蓋從250 bp到15,000 bp的范圍,能夠為大片段DNA的分析提供精確的參考。產品特點組成:DL15000 Plus 包含10條線狀雙鏈DNA片段,分別為250 bp、500 bp、1,000 bp、1,500 bp、2,500 bp、4,000 bp、5,000 bp、7,500 bp、10,000 bp和15,000 bp。即用型設計:已預混1×Loading Buffer,可直接上樣,無需額外處理。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩定性高:在-20℃下可長期保存,室溫下也能穩定保存6個月。使用方法上樣量:建議每次取2-5 ?L直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當增加上樣量。電泳條件:推薦使用0.6%-1.0%的瓊脂糖凝膠,電壓4-10 V/cm,電泳時間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,在紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融。瓊脂糖質量:電泳時應盡量選用高質量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。電泳緩沖液:及時更換電泳緩沖液并使用新制備的凝膠,以免影響電泳結果。Pfu DNA Polymerase是一種源自嗜熱菌Pyrococcus furiosus的高度熱穩定DNA聚合酶廣泛應用于分子生物學研究中.北京HPV病毒樣顆粒表達服務技術服務臨床前研究
Taq DNA 聚合酶的保真性相對較低,但該產品通過優化反應體系,限度地減少了錯誤摻入率。江蘇重組人源膠原蛋白技術服務研發
GTBE電泳緩沖液(1×):高效分離DNA片段的科研利器GTBE電泳緩沖液(1×)是一種專為DNA電泳設計的緩沖液,廣應用于分子生物學實驗中,尤其適用于分離相對較小的DNA片段(小于2000bp)。其主要成分包括甘氨酸、TBE(Tris-硼酸-EDTA)緩沖液。產品特點與優勢高效分離能力:GTBE緩沖液的緩沖能力較弱,但特別適合分離小于2000bp的DNA片段,能夠提供清晰的電泳條帶。兼容性高:該緩沖液可用于常規瓊脂糖凝膠電泳,也可用于脈沖場凝膠電泳,滿足多種實驗需求。穩定性強:GTBE電泳緩沖液(1×)在室溫下保存,有效期可達12個月,使用方便。使用方法制備凝膠:使用1×GTBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。加樣與電泳:將樣品加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中,進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用合適的核酸染料(如EB或GoldView)對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。注意事項**操作:為確保實驗**,操作時需佩戴實驗服和一次性手套。保存條件:產品應保存于室溫,避免長時間暴露在高溫或強光下。使用期限:GTBE電泳緩沖液(1×)的有效期為12個月,建議在開封后盡快使用。江蘇重組人源膠原蛋白技術服務研發