2025-02-13 01:05:47
T7EndonucleaseI(T7EI)是一種特殊的DNA內切酶,具有以下特點:1.**識別錯配DNA**:T7EI能夠識別并切割不完全配對的DNA、十字型結構DNA、Holliday結構或交叉DNA以及異源雙鏈DNA。2.**切割位點**:T7EI切割錯配位點5'端的、第二或第三個磷酸二酯鍵。3.**靈敏度**:T7EI對錯配DNA的識別非常靈敏,能夠檢測并切割單堿基和多堿基的錯配。4.**應用**:T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因編輯技術導致的基因突變的鑒定。它通過識別錯配DNA來幫助鑒定基因編輯是否成功以及是否有非目標效應。5.**直接電泳檢測**:T7EI的產物可以直接通過電泳進行檢測,這使得它在實驗操作中更為方便。6.**來源**:T7EI來源于大腸桿菌菌株,是一種麥芽糖結合蛋白(MBP)和T7核酸內切酶I(T7EI)的融合蛋白。7.**成本效益**:盡管T7EI在商業上使用時成本較高,但它在大規模樣本測試中,尤其是在基因突變鑒定方面,提供了一種有效的篩選方法。8.**特殊注意事項**:T7EI能夠識別長度大于或等于2bp的插入、缺失或突變導致的錯配DNA,但不能識別1bp的插入、缺失或突變。這些特點使得T7EndonucleaseI成為基因突變鑒定中一個非常有用的工具,尤其是在CRISPR/Cas9等基因編輯技術的應用中。利用牛痘DNA拓撲異構酶I的連接原理,可以在無需DNA連接酶的情況下,快速高效地連接DNA片段,實現克隆。Insulin alpha-chain (1-13)
BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶在分子生物學實驗中都是常用的酶,但它們之間存在一些關鍵的不同點:1.**來源和熱穩定性**:-**TaqDNA聚合酶**來源于嗜熱菌Thermusaquaticus,具有很好的耐熱性,能夠承受PCR的熱變性步驟。-**BstDNA聚合酶**來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus),同樣具有較高的熱穩定性,適用于等溫擴增,如LAMP技術,無需PCR熱循環。2.**酶活性**:-**TaqDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和5'-3'外切酶活性,但沒有3'-5'外切酶活性。這意味著它在DNA合成過程中可以校正一些錯誤,但保真性相對較低。-**BstDNA聚合酶**具有5'-3'聚合酶活性和強鏈置換活性,但缺乏5'-3'外切酶活性。這使得它在等溫擴增中更為有效,尤其是在需要高保真度和快速擴增的應用中。3.**應用領域**:-**TaqDNA聚合酶**主要用于PCR技術,適用于各種DNA片段的擴增,包括復雜模板和長片段的擴增。-**BstDNA聚合酶**特別適用于等溫擴增技術,如LAMP,這些技術不需要溫度循環,適用于快速、低成本的DNA擴增。4.**擴增速度和效率**:-**BstDNA聚合酶**在等溫擴增中顯示出比傳統TaqDNA聚合酶更快的擴增速度和更高的產量,尤其是在優化的LAMP反應中。
磁珠法DNA凝膠回收試劑盒是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中回收特定DNA片段的實驗室工具。與傳統的柱純化方法相比,磁珠法具有多個優勢:1.**操作簡便快捷**:磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的操作步驟通常包括凝膠的融化、DNA的結合、磁珠的洗滌和DNA的洗脫,整個過程可以在20分鐘內完成。2.**高純度和高回收率**:磁珠法能夠穩定、高效地從凝膠中回收DNA,純化所得的DNA可直接用于酶切、連接、轉化細菌、測序、PCR、雜交等后續操作。通常回收率達到60-80%,對于200bp以下小片段和10kb以上大片段的回收率有所下降。3.**適用性廣**:適用于100bp以上DNA片段的純化,對達到10kb片段DNA的純化也能保持較好的效果。4.****性高**:操作過程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,更加環保和**。5.**靈活性**:可以根據實際狀況靈活調節磁珠用量,適應不同體積和濃度的樣品處理。6.**自動化和高通量**:磁珠法純化試劑盒適合手工操作,也可用于自動化工作站或核酸自動提取儀,實現高通量操作。
磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應用非常廣,主要包括以下幾個方面:1.**PCR產物的純化**:磁珠法試劑盒可以從PCR反應液中回收不同片段大小的DNA,有效去除酶、dNTP、鹽類等雜質,回收率高,產物純度好,可以直接應用于PCR、連接、測序、NGS建庫等下游實驗。2.**基因組DNA的提取**:適用于從血液、唾液、口腔拭子和動物組織等樣品中分離純化高質量基因組DNA,提取的DNA片段大,純度高,質量穩定可靠,適合高通量工作站的自動化提取。3.**質粒DNA的提取**:磁珠用于從粗制的提取物中分離質粒DNA,通過精心優化的溶液將質粒DNA從基因組DNA和蛋白質中分離出來。4.**DNA片段的分離**:有許多類型的DNA分離試劑盒可供選擇,包括DNA片段的分離。DNA片段可能需要為下一代測序協議進行分離,在這種情況下,可以用能選擇分子大小的磁珠來分離片段。5.**自動化和高通量操作**:磁珠法試劑盒適合手工操作,也可用于自動化工作站或核酸自動提取儀,實現高通量操作。6.**分子生物學研究**:磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進化研究等領域有廣泛應用,為遺傳病研究、篩查等提供了強有力的技術支持。FnCas12a包含約1300個氨基酸,含有RuvC-like結構域,同時具有DNA和RNA內切酶的活性。
Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關鍵信息:來源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫擴增反應,如LAMP和CPA等。應用:主要應用于等溫DNA擴增,包括環介導等溫擴增(LAMP)和其他等溫擴增技術。規格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。產品形式:提供的產品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),貨號14402ES,以及凍干粉形式的產品,貨號14405ES,不含甘油。靈敏度和穩定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,低至5copies目的基因可測,且在飛克(fg)級別的模板量下也能快速達到閾值。在37°C下,該酶可以保持相對穩定的效應長達5天,并且在-20℃下可以穩定保存2年。儲存條件:建議在-25℃至-15℃下儲存,以保持產品活性,并避免反復凍融。牛痘DNA拓撲異構酶I的反應溫度為37°C。在這個溫度下,酶的活性高,能夠有效地進行DNA的切割和連接。Recombinant Human FLRT1 Protein,His Tag
UBE2L3在調節NF-κB信號通路中的作用可能對免疫反應和炎癥過程至關重要。Insulin alpha-chain (1-13)
pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實驗中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質-DNA相互作用的技術,pA-MNase在此技術中用于在免疫沉淀后切割染色質DNA,以分析特定蛋白質與DNA的結合位點。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質-基因組互作研究技術,pA-MNase在此技術中用于在目標蛋白質被抗體識別后,通過核酸酶活性切割附近的DNA,從而釋放與目標蛋白質相互作用的DNA片段。CUT&RUN技術相比傳統的ChIP-Seq具有實驗周期短、信噪比高、可重復性好以及細胞投入量低的優勢,尤其適用于早期胚胎發育、干細胞、**以及表觀遺傳學等研究領域。3.**染色質免疫沉淀實驗**:pA-MNase在染色質免疫沉淀實驗中用于染色質片段化,它在核小體間DNAlinker上進行切割保持了核小體的完整性,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過程中染色質乳化所帶來的負面影響。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細胞裂解液中的核酸,以減少樣品的粘度,這對于后續的蛋白質分析實驗尤為重要。