與文章一相似，文章二開(kāi)篇便在三種細(xì)胞系中驗(yàn)證單堿基編輯東西CBE用于點(diǎn)驟變高通量挑選的可行性和普適性。隨后研討者針對(duì)86種DDR基因開(kāi)展挑選試驗(yàn)以研討不同藥物處理下影響細(xì)胞存活的要害點(diǎn)驟變，結(jié)果發(fā)現(xiàn)53BP1、TRAIP等蛋白中存在功用各異的功用失活性點(diǎn)驟變（LOF）、功用獲得性點(diǎn)驟變（GOF）及功用分離性點(diǎn)驟變（SOF）。此外，研討者還發(fā)現(xiàn)，ATM激酶中的不同點(diǎn)驟變會(huì)對(duì)基因組穩(wěn)定性發(fā)生截然相反的影響，而乳腺疾病中用未知的CHK2激酶點(diǎn)驟變也經(jīng)過(guò)挑選研討被證實(shí)為L(zhǎng)OF驟變。高通量篩選技能在藥物研討方面的使用。化合物篩選模式

將化合物溶解并接種到384孔平板中，按順序進(jìn)行初度挑選，這些篩板作為一切進(jìn)行HTS的源頭，并在約6年的循環(huán)時(shí)間內(nèi)從固體樣品中不斷更新，其自動(dòng)揀選功能答應(yīng)每周多揀選幾千個(gè)樣品。NIBR的化合物管理小組從2008年到2012年在重建其化合物流轉(zhuǎn)才能方面作了重要的努力，主要包含兩個(gè)方面：（a）從LC-MS質(zhì)量操控的固體樣品中為一切化合物樣品（>1.2M）出產(chǎn)10mM儲(chǔ)備溶液，以及（b）安裝自動(dòng)化體系以實(shí)現(xiàn)從試管中進(jìn)行揀選和處理，并且在24小時(shí)內(nèi)可吸附多達(dá)40k管的微量滴定板（見(jiàn)圖2）。憑仗10mM的庫(kù)存收集和圖2中描述的自動(dòng)化設(shè)置，在2015年誕生了NIBR挑選渠道。在2019年，根據(jù)進(jìn)一步的規(guī)劃迭代（包含學(xué)習(xí)和經(jīng)驗(yàn)），在2015年的基礎(chǔ)上誕生了第二個(gè)版別。高通量菌種篩選高通量藥物篩選尋求充滿中線膠質(zhì)瘤的醫(yī)治方略。

在過(guò)去的十年中，表型挑選在藥物發(fā)現(xiàn)中再次變得越來(lái)越重要，其實(shí)際成果是測(cè)定和挑選級(jí)聯(lián)變得越來(lái)越雜亂，從而限制了可以挑選的化合物的數(shù)量。迭代挑選可以減少整體篩查化合物的數(shù)量，節(jié)省化合物庫(kù)存，縮短時(shí)間表和成本，更重要的是在進(jìn)行大規(guī)模篩查之前先驗(yàn)證或優(yōu)化測(cè)定方式。在經(jīng)典的HTS中，一切化合物均經(jīng)過(guò)測(cè)驗(yàn)，化合物在平板篩板上的散布對(duì)成果影響不大。但是在迭代多樣性驅(qū)動(dòng)的子集挑選中（如NIBR所實(shí)踐），正確的分配對(duì)于取得合理的成果至關(guān)重要。

纖維性疾病簡(jiǎn)直影響到身體的每一個(gè)組織，這種疾病的產(chǎn)生和發(fā)展會(huì)迅速導(dǎo)致組織功能障礙、機(jī)體組織衰竭，導(dǎo)致逝世。成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的大量沉積(I和V型膠原作為標(biāo)志物)是纖維化疾病的標(biāo)志。目前臨床可供使用的抗纖維化的藥物相對(duì)缺少。2021年，由MichaelGerckens等人開(kāi)發(fā)了一種根據(jù)表型挑選開(kāi)發(fā)新式抗纖維化藥物的辦法，并鑒定出一系列具有較高活性的抗纖維化化合物。挑選模型建立首要作者建立了一種深度學(xué)習(xí)模型(deeplearningmodel)，可以對(duì)高通量顯微成像取得的數(shù)千張細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)免疫染色圖片進(jìn)行批量分析，以確定具有改進(jìn)纖維化狀況的先導(dǎo)化合物。高通量篩選的方法有哪些？

在確認(rèn)候選藥物的進(jìn)程中，**、有效、穩(wěn)定、可控是藥物的基本特點(diǎn)，這四種性質(zhì)寓于藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)之中。候選藥物一旦確認(rèn)，化合物的藥學(xué)（物理化學(xué)）性質(zhì)、藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)、藥效學(xué)和**性，甚至臨床效果，皆成定數(shù)；10%的投入，其實(shí)決定了幾乎**的價(jià)值和藥物的命運(yùn)；所以，優(yōu)化先導(dǎo)物和確認(rèn)候選藥物進(jìn)程，是創(chuàng)新藥物的決定性過(guò)程。新藥研制成功率與本錢(qián)關(guān)于新藥研制的時(shí)刻和本錢(qián)，過(guò)去業(yè)界一直流傳著“雙十”的說(shuō)法，意思是：新藥研制需求耗時(shí)十年，耗資十億美金。而如今，各大跨國(guó)藥企覺(jué)得很“委屈”，認(rèn)為如今的一個(gè)新藥研制的本錢(qián)可遠(yuǎn)不止這數(shù)字，依照2014年TuftsCenter的統(tǒng)計(jì)陳述，現(xiàn)在研制個(gè)新藥的本錢(qián)現(xiàn)已高達(dá)25.88億美金！高通量藥物篩選的意義。中藥有效成分篩選

高通量篩選技能加速聯(lián)合用藥研討。化合物篩選模式

高通量篩選成果證明了單堿基編輯工具在點(diǎn)驟變篩選研討中的有效性，但篩選后的功用研討也證明了后續(xù)驗(yàn)證的必要性：特定條件下，CBE會(huì)在活性窗口之外誘導(dǎo)出重要點(diǎn)驟變，這只有通過(guò)后續(xù)驗(yàn)證方能發(fā)現(xiàn)。此外，研討者還針對(duì)有多種靶向抑制劑的PARP1基因開(kāi)展點(diǎn)驟變篩選，成果發(fā)現(xiàn)多種點(diǎn)驟變可改變藥物的敏感性和耐受性，部分點(diǎn)驟變的功用還具有抑制劑特異性：甚至對(duì)不同抑制劑有截然相反的影響。研討者對(duì)ClinVar數(shù)據(jù)庫(kù)中3584種基因的52,034種點(diǎn)驟變進(jìn)行高通量篩選，以研討順鉑和潮霉素處理后影響細(xì)胞存活的關(guān)鍵點(diǎn)驟變，成果發(fā)現(xiàn)很多DNA損傷修復(fù)基因的LOF點(diǎn)驟變?cè)谄渲邪缪葜匾巧；衔锖Y選模式